1. Tahapan Kultur Jaringan

a. Pembuatan Media

Merupakan faktor penentu dalam perbanyakan dengan kultur jaringan. Komposisi

media yang digunakan tergantung dengan jenis tanaman yang akan diperbanyak.

Media yang digunakan biasanya terdiri dari garam mineral, vitamin, dan hormon.

Selain itu, diperlukan juga bahan tambahan seperti agar, gula, dan lain-lain. Zat

pengatur tumbuh (hormon) yang ditambahkan juga bervariasi, baik jenisnya maupun

jumlahnya, tergantung dengan tujuan dari kultur jaringan yang dilakukan. Media yang

sudah jadi ditempatkan pada tabung reaksi atau botol-botol kaca. Media yang

digunakan juga harus disterilkan dengan cara memanaskannya dengan autoklaf pada

suhu 121º C selama 45 menit.

b. Sterilisasi eksplant Inisiasi kultur (Culture Estabilishment)

Sterilisasi eksplan merupakan bagian yang paling sulit dalam proses produksi bibit

melalui kultur jaringan. Sterilisasi biasanya dilakukan dalam beberapa tahap. Pertamatama

eksplan dicuci dengan deterjen atau bahan pencuci lain, selanjutnya direndam

dalam bahan-bahan sterilan baik yang bersifat sistemik atau desinfektan. Bahan-bahan

yang biasa digunakan untuk sterilisasi antara lain clorox, kaporit atau sublimat.

Sebagai contoh, sterilisasi eksplan tanaman dapat dilakukan sebagai berikut: tunas

yang akan digunakan sebagai eksplan dicuci dengan deterjen sampai betul-betul

bersih. Setelah itu, tunas diambil dan direndam berturut-turut dalam benlate (0,5%)

selama 5 menit, alkohol (70%) selama 5 menit, clorox (20%) selama 20 menit, dan

HgCl2 (0,2%) selama 5 menit. Akhirnya eksplan dibilas dengan aquades steril (3-5

kali) sampai larutan bahan kimia hilang. Apabila kontaminan tetap ada maka

konsentrasi dan lamanya perendaman sterilan dapat ditingkatkan.

Bahan yang digunakan serta metode sterilisasi biasanya berbeda untuk setiap

bahan tanaman, sehingga bahan dan cara tersebut belum tentu berhasil apabila

diaplikasikan pada bahan yang berbeda serta waktu yang berlainan. Dengan demikian,

setiap pekerjaan kultur jaringan, cara sterilisasi eksplan harus dicoba beberapa kali.

c. Penumbuhan eksplant dalam media cocok.

Setelah disterilkan eksplan ditumbuhkan dalam media kultur. Media yang banyak

digunakan sampai saat ini adalah media MS. Untuk mengarahkan biakan pada

organogenesis yang diinginkan, ke dalam media ditambahkan zat pengatur tumbuh.

d. Multipliksi atau perbanyakan planlet

Proses penggandaan tanaman dimana tanaman dipotong-potong pada bagian

tertentu menjadi ukuran yang lebih kecil kemudian ditanam kembali kemedia agar

yang telah disiapkan. Proses ini dilakukan secar berulang setiap tanggal waktu

tertentu. Pada setiap siklusnya tanaman dipotong dan menghasilkan perbanyakan

dengan tingkat RM (Rate Of Multiplication) tertentu yang berbeda-beda untuk setiap

tanaman.

Untuk Download Artikel Klik Gambar

Source: http://amronbadriza.blogspot.com/2012/06/cara-pasang-download-artikel-file-pdf.html#ixzz2CjjSkEro